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小白养细胞快速上手指南
来源于:上海安博电子·中国有限责任公司科技有限公司,浙江安博电子·中国有限责任公司科技有限公司 | 发布时间:2023/4/20 16:48:00
刚接触细胞培养的小白,生物实验技术理论知识一堆,但真正到操作环节手忙脚乱,一堆“黑话”一头雾水,常常不知从哪里下手。
耐思将系统介绍细胞培养知识,带领细胞小白从0到1,成为大神!

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01 为什么要进行细胞体外培养

社会上习惯于把科学和技术连在一起,统称为科学技术,简称科技。科学解决理论问题,技术解决实际问题。科技引领我们走向更好的生活
现代生物技术一般认为包括基因工程技术、细胞工程技术、酶工程技术和发酵工程技术,而这些技术的发展几乎都与细胞培养有密切关系。
医药领域(基因工程药物或疫苗在研究生产过程中很多是通过细胞培养来实现)、基因工程(乙肝疫苗很多是以 CHO 细胞作为载体)、细胞工程(杂交瘤单克隆抗体,完全是通过细胞培养来实现),既使是现在飞速发展的基因工程抗体也离不开细胞培养;正在倍受重视的基因治疗、体细胞治疗也要经过细胞培养过程才能实现,发酵工程和酶工程有的也与细胞培养密切相关。

总之,细胞培养在整个生物技术产业的发展中起到了很关键的核心作用。

02 细胞培养基本概念

细胞培养
将活细胞(尤其是分散的细胞)在体外进行培养的方法称为细胞体外培养。狭义的主要是指分离(散)细胞培养,广义的还包括单(个)细胞培养又称克隆,是指单个细胞通过有丝分裂形成的细胞群体。

原代细胞
初次培养。即培养物一经接种到培养皿中就不再分割,任其生长繁殖而不更换生长器皿。
 
传代培养
随着培养时间的延长、细胞不断分裂繁殖,细胞之间相互接触会发生接触性抑制,生长速度逐渐减慢甚至停止。培养皿中营养物逐渐不足,代谢产物不断累积,不利于细胞继续生长。在这种情况下,需要将培养物分割成小的部分,重新接到培养器皿中进行再培养。
 
细胞系
原代细胞培养物经首次传代培养后所繁殖的细胞群体。狭义的是指可连续传代的细胞,广义的是指可传代的细胞。正常细胞通常只能分裂有限的次数,随后就会丧失增殖的能力,这是一个由遗传决定的事件,被称为衰老。这种细胞系被称为有限细胞系;一些细胞系会通过转化的过程变为永生性细胞系,这一过程可自然发生,也可经化学或病毒诱导发生。有限细胞系发生转化获得无限分裂能力后就成为连续细胞系。

 

03 细胞培养的环境

细胞培养实验室的主要要求是时时维持细胞培养工作区域处于无菌状态,获得无菌条件最简单、经济的方式就是使用细胞培养超净台。
细胞培养超净台应足够一人使用,内外部均采用易清洁设计,具有充足的照明,使用舒适。
使用过程中需保持细胞培养超净台内工作空间整洁有序,将所有物品放在直视范围内,便于取用。使用前向放入细胞培养超净台内的物品喷洒70%的乙醇,擦拭清洁,进行消毒。

细胞培养通超净台的物品摆放一般遵循以下右手使用习惯,可根据特殊实验中增加的物品进行相应的适当改动。

 

超净台中部
摆放细胞培养类耗材。耐思细胞培养类耗材除了板、瓶、皿等常规耗材,更具备高品质大规模生物工艺器皿,规格全面,型号丰富。

 

超净台右前方
摆放移液耗材及器械,便于取用。耐思液体转移类耗材多样,移液吸头、离心管、真空过滤器、血清移液管等应有尽有。

 

超净台右后方
摆放生物试剂和培养基,便于吸取。耐思生物试剂类产品包含核酸提取与纯化试剂、PCR/RT-PCR相关试剂、实验室常规试剂、基因敲除试剂等。

 

超净台中后部
摆放试管架等,用于固定其他试剂。

 

超净台左后方
摆放小型容器,用于盛放废液。

 

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