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ECL化学化学发光底物(超敏)的操作步骤
来源于:上海安博电子·中国有限责任公司科技有限公司,浙江安博电子·中国有限责任公司科技有限公司 | 发布时间:2024/5/28 17:17:00

ECL化学化学发光底物(超敏)可为使用辣根过氧化物酶(HRP)偶联物的免疫印迹实验提供明亮的信号和低皮克级检测灵敏度。 该ECL底物能够兼容各种膜、封闭液和宽范围抗体稀释液,以出色性能、通用性和高性价比,满足用户的免疫印迹应用需求。

操作步骤:
1、执行常规SDS-PAGE、转模和Western Blot步骤。 注意用HRP标记lgG或用一抗-链亲和素-生物素-HRP夹法。
2、Western Blot最后一次洗模的同时配置发光工作液:分别取等体积的A液和B液,放入干净容器中混合(注意吸取A液和B液的吸头一定要分开,避免试剂污染)。 建议立即使用工作液,室温放置数小时后仍可使用但灵敏度有所降低。
3、Western Blot最后一次洗膜后,用镊子将膜取出,用滤纸吸去多余的洗涤液(切勿接触膜的蛋白面),然后置于一洁净保鲜膜上或塑料容器内。
4、根据膜的大小按比例滴加配置好的ECL工作液到膜上,确保工作液均匀覆盖在膜上,放置1-3分钟。
5、取膜,用滤纸吸去多余的液体,将膜放在两篇保鲜膜中间,随后进行压片检测或化学发光成像仪检测。
6、压片检测:将膜固定于X光胶片暗盒内(注意蛋白面向上)。 暗房内压X光胶片,分别曝光不同的时间,如数秒到数分钟,显影冲洗。
7、化学发光成像仪检测:将膜放置到化学发光成像仪内,参考仪器说明书进行检测。

*以上内容来自网络

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